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冻融交替

冻融交替

当全部的冰晶溶解后再次冷冻

  您好,请问最终是怎么解决的呢,最近我也是用反复冻融法试着裂解细胞,液氮、-80℃都试过了,但效果不好,显微镜下细胞形态完整~

  最近做实验需要裂解细胞并且不能加入除生理盐水以外的其他任何化学物质,采用的方法是液氮和37℃水浴反复冻融,每次冷冻大约3分钟,取出后水浴溶解,当全部的冰晶溶解后再次冷冻,共反复7次,但是效果十分差,相差倒置显微镜还可观测到很多未被裂解的细胞,检测出的蛋白浓度才1.83mg/ml,同样的样品(分装出的同一批次样品)加入裂解液后检测的蛋白浓度是38.27mg/ml。问题是为什么反复冻融7次后还有很多细胞还未被裂解?为什么冻融后检测的细胞浓度那么低?谢谢各位了!


点击次数:  更新时间:2019-11-07 19:55   【打印此页】  【关闭
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